XXXVI Congreso SETH

XXXVI Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia 132 CO-239 Asociación del eje SDF1/CXCR4 y MMP12 con la aterosclerosis clínica y subclínica: estudio experimental y clínico Marcos-Jubilar M 1 , Pastrana JC 1 , Orbe J 2 , Rodríguez JA 2 , Roncal C 2 , Fernández-Montero A 1 , Rodil R 3 , Colina I 1 , Páramo JA 4 1 Clínica Universidad de Navarra. Pamplona. 2 CIMA. CIBERCV. IdisNa. Pamplona. 3 Complejo Hospitalario de Navarra. Pamplona. 4 Clínica Universidad de Navarra. CIBERCV. IdisNa. Pamplona Introducción: La aterosclerosis se caracteriza por una in- flamación crónica vascular mediada por acción de las citoquinas quienes perpetúan la aterosclerosis y la enfermedad cardiovas- cular. Las metaloproteasas se han relacionado con la progresión aterosclerótica a través del eje SDF1/CXCR4 que media el reclu- tamiento de macrófagos a la pared vascular. Objetivo: El objetivo de este trabajo fue evaluar el papel de SDF1/CXCR4 y MMP12 en un modelo de ratón de aterosclerosis y su asociación con los niveles sistémicos de dichos marcadores y su asociación con el riesgo cardiovascular y el daño ateroscle- rótico. Material y métodos: Se evaluó la expresión de CXCR4/SDF1 y MMP12 mediante RT-qPCR en la aorta de ratones Apoe (-/-) y doble knockout (2KO) a los 10 y 16 meses. Además, se midió los niveles sanguíneos circulantes de SDF1, MMP12 y PCR en 298 pacientes con al menos dos factores de riesgo cardiovascular que presentaban o no evidencia de daño vascular (antecedente de enfermedad coronaria, cerebrovascular, arteriopatía periférica o nefroangiosclerosis). Asimismo, se evaluó la presencia de placa ateromatosas a nivel carotídeo, aórtico y femoral mediante ecogra- fía. El estudio se realizó a través de muestras de Biobanco (Uni- versidad de Navarra) y contó con la aprobación del comité ético. Resultados: CXCR4 y MMP12 se encontraban reducidos en ratones 2KO en comparación con ratones Apoe(-/-) a los 16 me- ses. SDF1, MMP12 y PCR se encontraban elevados en pacientes con daño vascular, solamente SDF1 y PCR permanecían eleva- dos tras ajustar por factores de riesgo cardiovascular. Tras ajustar por creatinina, las diferencias tan solo se mantuvieron con SDF1. Aquellos pacientes que presentaron simultáneamente niveles de PCR y SDF1 superiores al punto de corte establecido, tenían un riesgo 4,5 veces mayor de haber presentado un evento (p = 0,004) tras ajustar por edad, sexo y factores de riesgo cardiovascular. Ningún marcador se asociaba a la presencia o extensión de placas ateroscleróticas, si bien aquellos pacientes que presentaban pla- cas focales carotídeas tenían niveles elevados de PCR. Conclusiones: SDF1 y MMP12 se encuentran elevados en pacientes con daño vascular con repercusión clínica. La combi- nación de SDF1 y PCR nos permite identificar a un grupo de pa- cientes de especial riesgo inflamatorio. CO-240 Las vesículas extracelulares aumentan la expresión de ICAM-1 y VCAM-1 en un modelo in vitro de disfunción endotelial asociada a pacientes diabéticos con enfermedad renal crónica Torramadé-Moix S 1 , Palomo M 2 , Montagud-Marrahi E 3 , Ramírez-Bajo MJ 3 , Rovira J 3 , Bañón-Maneus E 3 , Hermida E 3 , Diekmann F 3 , Ventura-Aguiar P 3 , Díaz-Ricart M 2 1 Departament d’Anatomia Patològica. Hospital Clínic. Centre de Diagnòstic Biomèdic (CDB). Institut d’Investigació Biomèdica August Pi i Sunyer (IDIBAPS). Universitat de Barcelona. Barcelona. 2 Departament d’Anatomia Patològica. Hospital Clínic. Centre de Diagnòstic Biomèdic (CDB). Institut d’Investigació Biomèdica August Pi i Sunyer (IDIBAPS). Universitat de Barcelona. Institut d’Investigació contra la Leucèmia Josep Carreras. Barcelona Endothelium Team. Barcelona. 3 Departament de Nefrologia i Trasplantament Renal. Hospital Clínic. Laboratori Experimental de Nefrologia i Trasplantament. Fundació Clínic. IDIBAPS. Barcelona Introducción: Las vesículas extracelulares (VE) son estruc- turas membranosas secretadas por las células que se han descrito como mediadores potenciales de mecanismos patogénicos en la disfunción endotelial (DE), provocando la estimulación o supre- sión de la expresión génica del endotelio. Los mecanismos de la DE en los pacientes con enfermedad renal crónica (ERC) y diabetes mellitus tipo 1 (DMT1) no están bien definidos, aunque las VE pueden tener un papel importante. Métodos: Obtuvimos sangre de 11 pacientes con ERC por nefropatía diabética por DMT1, que fueron agrupados en 4 pools . El efecto específico de las VE se estudió exponiendo células mi- crovasculares HMEC-1 en cultivo a: suero de paciente, suero de paciente sin VE, suero control sin VE al que se añadieron VE de los sueros de pacientes, suero control sin VE, y suero con- trol sin VE restablecido con sus propias VE. Evaluamos cambios mediante inmunofluorescencia en: i) la expresión de receptores de adhesión leucocitaria (ICAM-1 y VCAM-1); ii) trombogeni- cidad, evaluando la presencia de factor Von Willebrand (FVW) y la adhesión plaquetaria mediante estudios de perfusión de sangre sobre las matrices extracelulares secretadas por las células endo- teliales (MEC). Resultados: En respuesta a la exposición a los sueros de los pacientes, se observó una mayor expresión de los marcadores ICAM-1 VCAM-1, FVW y un incremento en el porcentaje de superficie recubierta por plaquetas (% SC) sobre las MEC com- parado con el suero control (p < 0,01). Se identificó que la elimi- nación de VE de los sueros de pacientes reduce significativamente el incremento en la expresión de ICAM-1 y VCAM-1 (p < 0,01) (Fig. 1). No obstante, la ausencia de VE no tuvo efecto en la ex- presión de FVW ni se cuantificaron cambios en % SC respecto al suero de los pacientes (Fig. 2). Asimismo, suplementar el suero control sin VE con VE procedentes de los pacientes generó un incremento de la expresión de ICAM-1 y VCAM-1 respecto a los controles (p < 0,01), menor para el FVW (p < 0,05) y no se apreciaron cambios en % SC. Conclusiones: Los resultados de este estudio sugieren que las VE circulantes en pacientes con ERC asociada a DMT1 pro- mueven el daño endotelial mediante un incremento en la expre- sión de marcadores de inflamación como ICAM-1 y VCAM-1, constituyendo un elemento patogénico en la DE. No obstante, el rol de las VE parece más modesto en términos de trombogenici- dad, evaluada mediante la expresión de FVW y la reactividad de la matriz extracelular.