XXXVI Congreso SETH

XXXVI Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia 160 se observó que la activación de RAGE con AGE-BSA aumentó significativamente la agregación plaquetaria (58,50 ± 7,8 %) y la exposición de P-selectina (IMF: 3402 ± 844,1) versus el control. Estos efectos disminuyeron en presencia del inhibidor específi- co de RAGE (FPS-ZM1), confirmando que RAGE es importante para la función y activación plaquetaria. Finalmente, se predijo que la región estimulada por AGE-BSA se encuentra en la región V de RAGE y también 13 aminoácidos son críticos para su unión. Conclusiones: En conclusión, la expresión de RAGE en plaquetas humanas es diferente según grupo etario y condición. Se confirmó que la activación de RAGE afecta la funcionalidad plaquetaria. Finalmente, se predijo la región crítica para su esti- mulación. Esta información es crucial para en el futuro proponer posibles tratamientos para las ECV. Conflicto de intereses: Los autores declaran que no tienen intereses en competencia. PO-366 Identificación de la primera variante molecular que afecta al dominio transmembrana del receptor de colágeno GPVI en un paciente con disfunción plaquetaria y sangrado moderado Palma Barqueros V 1 ; Rodríguez-Moreno F 1 ; Bohdan N 1 ; Revilla N 1 ; Padilla J 1 ; Rodríguez-Alén A 2 ; González-Porras JR 3 ; Vicente V 4 ; Bastida JM 1 ; Rivera J 3 1 Servicio de Hematología y Oncología Médica. Hospital General Universitario Morales Meseguer. Centro Regional de Hemodonación. Universidad de Murcia. IMIB-Arrixaca. CB15/00055-CIBERER. Murcia. 2 Servicio de Hematología y Hemoterapia. Hospital Virgen de la Salud. Toledo. 3 IBSAL. IBMCC. Universidad de Salamanca. CSIC. Centro de Investigación del Cáncer. Salamanca. 4 Departamento de Hematología. Hospital Universitario de Salamanca. Salamanca Introducción: El receptor plaquetario GPVI es, junto con la integrina a2ß1, esencial en la adhesión y activación de las pla- quetas al/por colágeno subendotelial. Su interacción con otros ligandos también contribuye en el crecimiento y estabilización del trombo. GPVI pertenece al subgrupo de inmunorreceptores con dominios ITAM (immunoreceptor tyrosine-based activation motif), en cuya cascada de señalización destacan la tirosina qui- nasa Syk y la fosfolipasa C gamma-2 (PLC γ 2). La deficiencia congénita de GPVI es una enfermedad rara asociada a sangrado moderado. Hasta la fecha se han descrito 5 familias y solo 3 de ellas con diagnóstico molecular. Objetivo: Caracterización fenotípica y molecular de una pa- ciente con clínica hemorrágica y sospecha de trombopatía here- ditaria. Métodos: Paciente mujer de 59 años reclutada en el proyecto multicéntrico español “Caracterización Funcional y Molecular de Pacientes con Trastornos Plaquetarios Congénitos”. La clínica hemorrágica se evaluó con el ISTH-BAT. Se realizó un estudio básico con hemograma, coagulación y factor von Willebrand. El fenotipo plaquetario se estudió mediante expresión de glicopro- teínas (GP) por citometría de flujo (CF, kit Biocytex); activación plaquetaria por agonistas por CF [unión de fibrinógeno (Fg) y secreción de CD62 y CD63]; agregación plaquetaria (LTA); cuan- tificación de GPVI por western blot (WB) y de mRNA de GP6 mediante RT-qPCR; valoración de señalización intraplaquetaria de GPVI (fosforilación de Syk y PLC γ 2 en plaquetas estimuladas con CRP (collagen-related-peptide); y cinética de spreading de plaquetas mediante inmunofluorescencia en matriz de colágeno, Fg y poli-l-lisina. Resultados: El score de sangrado fue de 8. El estudio básico fue normal. El análisis molecular (HTS-panel de genes) identificó una deleción nueva en heterocigosis c.708_711delCGAA (p.As- n236Lysfs*105) en el gen GP6, confirmada por Sanger también en los familiares afectos. Las pacientes mostraron una reducción del 50 % en la expresión GPVI medida por CF y por WB. El defecto proteico no es debido a transcripción anómala de GP6, pues encontramos niveles similares de ARNm deGP6 en la pa- ciente. También, observamos en la propositus una reducción mo- derada en la expresión de FcR γ -chain, la proteína que se asocia con GPVI para formar un receptor funcional. La deficiencia de GPVI- γ -chain, se reflejó en una LTA, unión de Fg y secreción de CD62 y CD63 marcadamente reducida en respuesta a CRP, y prácticamente normal con otros agonistas ensayados (ADP, PAR1, PAR4, PMA y análogo de TxA2). Además, las plaquetas de la paciente mostraron, vs. el control, una alteración en la seña- lización de GPVI con menor fosforilación de Syk y PLC γ 2, y una menor capacidad de spreading en las distintas matrices. Conclusiones: Identificamos la primera variante genética na- tural de GP6, que altera su secuencia de lectura normal y genera una GPVI truncada a mitad del dominio transmembrana y carente del dominio intracelular. La presencia de esta variante en hetero- cigosis ocasiona un defecto cuantitativo (50 %) y funcional pro- vocando un sangrado moderado en la familia. Este estudio amplia el espectro genético de la deficiencia congénita de GPVI, y puede ayudar a entender mejor la relación estructura-función de GPVI, así como su la asociación de GPVI con la FcR γ -chain. ISCIII-FederPI17/01311&PI17/01966, FMMAP172142019, SETH-FETH Premio López Borrasca 2019, F.Séneca 19873/ GERM/15, GT-Patología Hemorrágica-SETH. PO-367 Papel de la activación del sistema complemento en la fisiopatología de la preeclampsia grave y síndrome Hellp Palomo M 1 ; Crispi F 2 ; Blasco M 3 ; Paules C 2 ; Crovetto F 2 ; Molina P 4 ; Torramade-Moix S 4 ; Carreras E 1 ; Escolar G 4 ; Campistol JM 3 ; Gratacos E 2 ; Díaz-Ricart M4 1 Instituto de Investigación contra la Leucemia Josep Carreras. Barcelona. 2 Grupo de Investigación en Medicina Fetal y Perinatal. Servicio de Medicina Materno Fetal. IDIBAPS. Corporació Sanitària Clínic (Hospital Clínic de Barcelona y Hospital Sant Joan de Deu). ICGON, IDIBAPS, UB y Centro de Investigación Biomédica de Enfermedades Raras (CIBER-ER). Barcelona. 3 Departamento de Nefrología y Trasplante Renal. Hospital Clínic de Barcelona. IDIBAPS. Universidad de Barcelona. Barcelona. 4 Departamento de Hematopatología. Hospital Clínic de Barcelona. Centro de Diagnóstico Biomético (CDB). Instituto de Investigación Biomédica August Pi i Sunyer (IDIBAPS). Universidad de Barcelona. Barcelona