XXXVI Congreso SETH

XXXVI Congreso Nacional de la Sociedad Española de Trombosis y Hemostasia 164 una PTI persistente (entre 3 a 12 meses de diagnóstico) y el res- to por PTI crónica (> 12 meses desde el diagnóstico). El 64 % de los individuos recibió el tratamiento como terapia de segunda línea y los pacientes restantes en líneas sucesivas. Con respecto a la discontinuación, 27 de los 60 pacientes (45 %) cumplía los criterios para discontinuación. De estos 27 pacientes, en 20 se logró discontinuar el aTPO (74 % de los pacientes con criterios, 33 % del total de pacientes analizados). La mediana de tiempo transcurrido desde el inicio de tratamiento con aTPO y la retira- da del tratamiento fue de 1 año y el recuento plaquetar medio al momento de la discontinuación fue de 188 x 10 9 /L (rango de 10 9 a 414 x 10 9 /L). Con un seguimiento mediano de 3 años desde la discontinuación, 20 pacientes mantienen respuesta: 17 de ellos respuesta completa y 3 respuesta parcial. La media del recuento de plaquetas objetivada en el último control de los pacientes fue de 203 x 10 9 /L. Siete pacientes no lograron la discontinuación por recidiva de la enfermedad de forma precoz (primeros 6 meses; n = 5) o de forma tardía (> 6 meses; n = 2). En todos los casos se rein- trodujo el mismo aTPO administrado previamente y se alcanzó buena respuesta. No se ha llevado a cabo ningún segundo intento de discontinuación. Finalmente, no se detectaron factores predic- tores del mantenimiento de la respuesta tras la discontinuación. Conclusión: Nuestros datos muestran que, con un segui- miento mediano de 3 años tras parar el tratamiento, un 33 % de los pacientes que inician un aTPO logran una respuesta manteni- da tras la discontinuación. Conflicto de intereses: Sin conflictos de interés. PO-372 Las plaquetas de neonatos presentan alteraciones en la agregación inducida por trombina y en la maquinaria relacionada con el control de calción intracelular Berna-Erro A 1 ; Cantonero C 1 ; Delgado E 2 ; Corbacho AJ 1 ; Brull JM 1 ; Salido Ginés M 1 ; Ferrer-Marín F 3 ; Granados MP 1 ; Redondo PC 1 1 Departamento de Fisiología (Phycell). Universidad de Extremadura. Cáceres. 2 Banco de Sangre y Tejidos de Extremadura. Mérida, Badajoz; 3 Unidad de Hematología y Oncología Médica. Hospital Universitario Morales Meseguer. Centro de Hemodonación. IMIB-Arrixaca. CIBERER. UCAM. Murcia Introducción: En la bibliografía se ha constatado la existen- cia de una reducción en la agregación en las plaquetas de neo- natos con respecto a la de los adultos, lo cual puede derivar en patologías como hemorragias intracraneales (constatadas hasta en el 22 % de los bebes prematuros) (1-2). Puesto que los cambios en la concentración del ion calcio (Ca2+) a nivel intracelular son muy importantes para la correcta activación de las plaquetas en individuos adultos (3), nosotros hemos considerado la posibilidad de que las plaquetas de neonatos presentes alteraciones en los me- canismos de regulación del Ca2+, lo cual podría ser la causa de la hiporeactividad plaquetaria de los neonatos. Material y métodos: Hemos empleado tanto la sangre del cordón umbilical como la sangre periférica de la propia madre para aislar plaquetas por centrifugación diferencial. Una vez aisladas, hemos empleado dichas plaquetas para realizar expe- rimentos de agregación y experimentos de determinación de la concentración de Ca2+ libre intracelular por espectrometría de fluorescencia empleando la sonda fluorescente, fura-2 (4). Adi- cionalmente, hemos aislado el ARNm y las proteínas para anali- zar posibles alteraciones en la expresión de proteínas tanto a nivel de ARNm, como de proteínas por WB. Resultados: Como se esperaba, hemos observado menor agregación plaquetaria en los neonatos en respuesta al agonista plaquetario (Thr) con respecto a los valores observados en sus propias madres. Las plaquetas neonatales presentaron además una entrada de Ca2+ alterada con respecto a las de los adultos. Cuando las plaquetas se incubaron con TG (un inhibidor que blo- quea la recaptación de Ca2+ al sistema tubular denso) provoca una activación del mecanismo conocido como entrada capacita- tiva de calcio (ECC) (4-5), la cual está alterada en plaquetas de neonatos con respecto a las plaquetas de adultos. Adicionalmente, estudiamos la entrada de calcio inducida por el mensajero secun- dario diacilglicerol (DAG) (6), la cual no presentó alteración en ninguno de los sujetos estudiados, lo que indica que los defectos presentados en las plaquetas de neonatos se deberían exclusiva- mente a las alteraciones de la ECC. Con el fin de profundizar en el mecanismo, evaluamos por Array y, posteriormente, por WB, los niveles de expresión de proteínas implicadas en la ECC, re- sultando que tanto STIM1 (el sensor de Ca2+ del sistema tubular denso) como SARAF (un regulador directo de STIM1) estaban alterados en neonatos. Conclusiones: Resumiendo, en la presente investigación ca- racterizamos una alteración de la homeostasis del Ca2+ intrace- Tabla I. Características de los pacientes Características Pacientes n = 60 Edad media, años (rango) 62 (23-96) Sexo femenino, n (%) 32 (63) Comorbilidad, n (%) Hepatopatía 2 (3) Enfermedad autoinmune 7 (12) VIH 0 (0) VHB 8(13) VHC 4(6) Trasplante previo 4(6) Síndrome linfoproliferativo 4(6) Hemograma diagnóstico, media (rango) Hb 13,5 (8,2-17,7) Leucocitos 8,7 (2,7-24,2) Plaquetas 18,6 (0-75) Reticulocitos 77,5 (22-150)